廢水處理親和沉淀是分離過(guò)程的一部分,但是其沉淀原理與通常的沉淀方法有很大的不同。它是利用蛋白質(zhì)與特定的生物的或合成的分子(免疫配位體、基質(zhì)、輔酶等)之間高度專一的相互作用而設(shè)計(jì)出來(lái)的一種特殊選擇性的分離技術(shù),所以其沉淀原理不是依據(jù)蛋白質(zhì)溶解度的差異,而是依據(jù)“吸附”有特殊蛋白質(zhì)的聚合物的溶解度的大小。親和過(guò)程提供了一個(gè)從復(fù)雜混合物中分離提取出單一產(chǎn)品的有效方法。
這個(gè)技術(shù)包含有三個(gè)步驟:①在初始階段,將一個(gè)目標(biāo)蛋白質(zhì)與鍵合在可溶性載體上的親和配位體絡(luò)合形成沉淀;②所得沉淀物用一種適當(dāng)?shù)木彌_溶液進(jìn)行洗滌,洗去可能存在的雜質(zhì);③用一種適當(dāng)?shù)脑噭⒛繕?biāo)蛋白質(zhì)從配位體中離解出來(lái)。
配位體可以是均相雙功能的,也可以是非均相雙功能的。均相雙功能配位體有兩個(gè)相同的親和配基聯(lián)結(jié)在一個(gè)可溶性載體上并用于沉淀多一亞單位蛋白質(zhì)(或蛋白質(zhì)單體用不只一個(gè)偶聯(lián)點(diǎn)的配位體)。例如每個(gè)蛋白質(zhì)分子能結(jié)合不只一個(gè)配位體,每個(gè)配位體能結(jié)合至少兩個(gè)蛋白質(zhì)分子并形成一個(gè)三維結(jié)構(gòu),這種配位體的型式如用Cibacron藍(lán)F3G—A三嗪染料衍生物來(lái)沉淀NAD相關(guān)的脫氫酶[1川。另一個(gè)例子是用在表面上的金屬配位殘基來(lái)沉淀蛋白質(zhì),將亞氨基二醋酸螯合的Cu(Ⅱ)復(fù)合體,固定到一個(gè)可溶性的聚乙二醇分子上并用于沉淀血紅球蛋白。